Sposobnost ocenjevanja števila trombocitov je bistvenega pomena pri delu v laboratoriju. Trombociti so fragmenti citoplazme, ki pomagajo pri strjevanju krvi. Število trombocitov se uporablja za določanje trombocitopenije (nizko število trombocitov) in trombocitoze (visoko število trombocitov). Po podatkih Nacionalnega inštituta za zdravje je normalno število trombocitov med 150.000 in 400.000 trombocitov na mikroliter krvi. Trombocitopenija je povezana z aplastično anemijo, pomanjkanjem folata, pomanjkanjem vitamina B12 in akutno levkemijo. Trombocitoza je povezana s hemolitično anemijo in policitemijo vero (prekomerna proizvodnja rdečih krvnih celic).
$config[code] not foundVzorec krvi razredčite v razmerju 1: 100 krvi in razredčila (amonijev oksalat). Pipeto aseptično odstranite iz ščita tako, da konico ščitnika pipete potisnete skozi diafragmo v vratu rezervoarja. Dotaknite se ustnice pipete v kri in pustite, da se pipeta napolni s krvjo. Odprite pipeto s kazalcem in postavite pipeto v vrat rezervoarja. Sprostite pritisk na rezervoar in odstranite kazalec s pipete. Pustite stati 10 minut, da se rdeče krvne celice hemolizirajo.
Napolnite hemocitometer, ki je steklena stran, s komoro za štetje, ki vsebuje izmerjene linije znane globine, s krvjo tako, da stisnete stranice rezervoarja; nato postavite hemocitometer v pokrito petrijevko in pustite stati 10 minut. Hemocitometer postavite na oder (ploska platforma, ki se uporablja za nameščanje diapozitivov) svetlega ali faznega mikroskopa in izostrite območje hemocitometra z uporabo cilja nizke moči.
Preklopite na cilj 43X, da povečate povečavo in izostrite velik osrednji kvadrat hemocitometra. Štetje trombocitov v vseh 25 kvadratih znotraj enega velikega kvadrata hemocitometra, štetje od leve proti desni v prvi vrsti, nato v levo proti desni v drugi vrsti, dokler niso vse vrstice popolne.
Pomnožite število celic, preštetih za 1.000, da dosežete skupno število trombocitov; na primer, če je število celic = 250, potem 250 x 1.000 = 250.000 trombocitov na mikroliter.
Nasvet
Svojo oceno morate opraviti na območju brisa, v katerem se rdeče krvne celice komaj dotaknejo. Postopek ponovite, če opazite grudice trombocitov.
Opozorilo
Število trombocitov opravite v 3 urah po pripravi razredčitve.